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1.File->Open->打開需要分析的WB條帶。

2.Image–>Type->8-bit,將圖像轉(zhuǎn)換為8-bit的灰度圖片;Image->Invert，黑白反轉(zhuǎn)，得到如下圖片：

3.Analyze->Calibrate,校正光密度值Function中選擇Uncalibrated OD，左下方Global calibration，勾選表示有多張圖片打開時(shí)對(duì)所有圖片進(jìn)行此操作。否則只對(duì)當(dāng)前圖片進(jìn)行此操作。

4.在工具欄中選擇矩形工具——Rectangular,最左邊的為矩形工具，選擇條帶：

鍵盤上按數(shù)字1，彈出如下提示框：

點(diǎn)Yes，鍵盤上按數(shù)字3，得到如下：

5.工具欄中選擇直線工具——Straight，下圖最右邊的為直線工具，按住Shift鍵使用直線工具畫豎線將步驟4的峰進(jìn)行分割：

6.選擇魔棒工具——Wand tool，分別點(diǎn)擊分割好的峰，即可得到結(jié)果，保存結(jié)果File->Save as…即可：

7.WB統(tǒng)計(jì)分析一般將對(duì)照組標(biāo)準(zhǔn)化為100%或1，上述結(jié)果6個(gè)條帶前3個(gè)為對(duì)照組。在Excel中，先計(jì)算對(duì)照組3個(gè)的平均值A(chǔ)VERAGEB2:B4：然后所有B列的數(shù)值除以對(duì)照組平均值，此時(shí)對(duì)照組的均值為1：

8.將所得數(shù)據(jù)放入Graphpad prism繪圖即可：